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在冠狀病毒2019-nCoV的分子生物學(xué)研究中，電泳技術(shù)是一個(gè)重要方法，主要用于核酸、蛋白質(zhì)的分離與鑒定，使用的實(shí)驗(yàn)儀器主要是電泳儀。本文，樂(lè)楓純水為大家總結(jié)了實(shí)驗(yàn)中常出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法。
一、什么是核酸電泳？
核酸電泳是基因操作的核心技術(shù)之一，用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA小片段。
二、核酸電泳異常條帶問(wèn)題
核酸電泳實(shí)驗(yàn)中，常常會(huì)遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現(xiàn)象，究其原因，除了操作不當(dāng)，電泳條件未優(yōu)化，電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強(qiáng)度影響DNA的電泳遷移率。
表1 核酸電泳條帶異常的原因匯總及建議的解決方法
常見問(wèn)題 | 原因 | 解決方法 |
條帶模糊 | 核酸降解 | 使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液 |
電泳緩沖液陳舊 | 建議經(jīng)常更換緩沖液 | |
有蛋白污染 | 使用低有機(jī)物的超純水配置緩沖液 | |
核酸變性 | 使用超純水或者緩沖液稀釋樣品 | |
條帶黯淡 | 核酸濃度過(guò)低 | 增加上樣量 |
核酸降解 | 使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液 | |
條帶被示蹤染料掩蓋 | 避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料 | |
拖帶或涂抹帶 | PCR體系或PCR程序不合適 | 優(yōu)化PCR體系和PCR程序 |
條帶扭曲 | 配膠緩沖液和電泳緩沖液不同 | 配膠和電泳中使用同一批緩沖液 |
電泳時(shí)電壓過(guò)高 | 控制電泳時(shí)電壓不超過(guò)6V/CM |
三、核酸電泳用純水要求
為了防止水中雜質(zhì)（如：核酸酶、蛋白質(zhì)、離子等）對(duì)電泳結(jié)果的影響，核酸電泳實(shí)驗(yàn)配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水：
● 電阻率 18.2 MΩ·cm
●TOC < 10 ppb
● 無(wú)核酸酶
● 細(xì)菌總數(shù)< 1 CFU/mL
● 熱原< 0.005 EU/mL
● 0.22 μm 或更低的顆粒過(guò)濾
四、核酸電泳用純水機(jī)推薦
樂(lè)楓生物新一代Genie系列智能純水系統(tǒng)是一款專注于解決用戶需求的實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)。Genie系列智能純水系統(tǒng)采用樂(lè)楓理念——無(wú)線連接、“1+N”模式，具有系統(tǒng)智能化、設(shè)計(jì)人性化、水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化三大特色。
廣州某疾控中心安裝的Genie G以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)EDI純水和超純水
荷蘭安裝的Genie U以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)RO純水和超純水
穩(wěn)定可靠的水質(zhì)
• 集合優(yōu)化的流路設(shè)計(jì)、技術(shù)先進(jìn)的 EDI 模塊和樂(lè)楓LeFil 和OrganeFil 配方填料的超純化柱，純水和超純水水質(zhì)達(dá)到或超過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室用水標(biāo)準(zhǔn)；
• 配備RephiBio 終端過(guò)濾器，可有效去除水中的熱原（內(nèi)毒素）、核酸酶、細(xì)菌等雜質(zhì)，滿足核酸電泳實(shí)驗(yàn)用水要求。
用戶體驗(yàn)佳
• 觸控屏采用高靈敏度防水屏幕，可帶乳膠手套操作
• 采用智能IT技術(shù)，取水手柄與主機(jī)可無(wú)線連接，取水點(diǎn)與主機(jī)的距離不受電線長(zhǎng)度的限制，讓您享受“無(wú)線 · 自由”的用水體驗(yàn)；
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關(guān)于樂(lè)楓生物
樂(lè)楓生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家專業(yè)從事水純化和實(shí)驗(yàn)室分離純化產(chǎn)品研發(fā)、設(shè)計(jì)和制造的企業(yè)，為高科技生物技術(shù)和生命科學(xué)領(lǐng)域的用戶服務(wù)。樂(lè)楓公司著眼于發(fā)展，在中國(guó)、美國(guó)、法國(guó)、印度、南非等近20個(gè)國(guó)家建立了銷售機(jī)構(gòu)，同時(shí)也為大型公司提供OEM和ODM，產(chǎn)品銷往包括歐美的近100個(gè)國(guó)家。成立十余年，樂(lè)楓持續(xù)投入研發(fā)，創(chuàng)立出了自己的產(chǎn)品品牌RephiLe（瑞楓），推出了多個(gè)新概念產(chǎn)品- 無(wú)線連接的Genie系列純水系統(tǒng)和智能型大流量純水工作站Super-Genie等。目前樂(lè)楓純化柱填料配方齊全，也提供多款密理博純水系統(tǒng)的兼容耗材。
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